| Japanese |
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| Title | ヒトTSHモノクローナル抗体を用いた2-サイトイムノラジオメトリックアッセイの平衡論的解析 |
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| Subtitle | 原著 |
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| Authors | 小幡公道*, 久保恵宣*, 岡根由香*, 加藤明彦*, 池田勲夫*, 倉田邦夫* |
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| Authors(kana) | |
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| Organization | *ダイナボット株式会社研究開発部 |
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| Journal | 核医学 |
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| Volume | 26 |
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| Number | 3 |
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| Page | 349-359 |
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| Year/Month | 1989/3 |
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| Article | 原著 |
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| Publisher | 日本核医学会 |
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| Abstract | 「要旨」 ヒトTSHに対して作製した10種類のモノクローナル抗体を利用して, 2-サイトイムノラジオメトリックアッセイ (IRMA) によるTSH測定を行い, 平衡論的解析から求めた理論値と比較することで, その実用的意義を検討した. 10種類の抗体の平衡定数は2.5×108から3.3×1010M-1であった. ビーズ固相化抗体とトレーサ抗体を作製し, 平衡定数の異なる種々の組み合わせにより平衡に達する条件で標準曲線を作成した. 実験に使用した固相化抗体とトレーサ抗体の濃度はそれぞれ2×10-8Mと1.5×10-10Mであった. 一方, IRMAを平衡論の立場から解析して得た標準曲線の理論式を用いて平衡定数が1×108〜1×1011M-1の種々の組み合わせについて理論曲線を作成し, 実験値と比較した. 理論曲線は平衡定数が大きくなるにしたがい低濃度側へほぼ平行に移動するものの, 固相化抗体とトレーサ抗体の平衡定数がそれぞれ1×109M-1以上および1×1010M-1以上では平衡定数が無限大の条件でのカーブに近似され, 高感度測定における限界に達することがわかった. このときの測定上限は, トレーサ抗体濃度にほぼ等しい約2×10-10Mであった. モノクローナル抗体を用いた実際の標準曲線では多くの抗体の組み合わせで理論値とよく一致したカーブが得られ, 平衡論的解析が実験値の推定に有用であることを確かめた. 最小検出感度についても理論値と実験値はよく一致し, 理論的に可能な最小検出感度は4×10-14M (TSH濃度で約0.005μIU/ml) であった. IRMAの平衡論的解析の有用性を, ヒトTSHに対するモノクローナル抗体を用いた実験結果と比較することで明らかにし, 抗体の平衡定数を知ることがモノクローナル抗体を用いたIRMAの開発における測定限界を知る上で有用であることを確かめた. |
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| Practice | 臨床医学：一般 |
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| Keywords | Affinity constant, Monoclonal antibody, Immunoradiometric assay, Human TSH, Equilibrium |
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| English |
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| Title | Mathematical Analysis of Equilibrium on 2-site Immunoradiometric Assay Using Anti-Human TSH Monoclonal Antibody |
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| Subtitle | |
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| Authors | Kimimichi OBATA, Yoshinobu KUBO, Yuka OKANE, Akihiko KATO, Isao IKEDA, Kunio KURATA |
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| Authors(kana) | |
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| Organization | Dainabot CO.,Ltd. |
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| Journal | The Japanese Journal of nuclear medicine |
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| Volume | 26 |
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| Number | 3 |
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| Page | 349-359 |
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| Year/Month | 1989/3 |
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| Article | Original article |
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| Publisher | THE JAPANESE SOCIETY OF NUCLEAR MEDICINE |
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| Abstract | [Summary] A mathematical analysis of equilibrium was adapted on a practical 2-site immunoradiometric assay (IRMA) using 10 murine monoclonal antibodies (Mabs) to human TSH. The affinity constant of 10 Mabs was from 2.5×108 to 3.3×1010M-1. The dose-response curves using appropriate combinations of Mab-coated bead and 125I-labeled Mab were compared with the theoretical curves calculated from mathematical analysis of equilibrium. Theoretical curves were directly affected by the affinity constants in which antibodies with higher affinity constants showed higher binding activity of tracer. However, the curves which antibodies have more than 1×109M-1 and 1×1010M-1 for capture antibody and tracer antibody did not show remarkable change, but were similar with the curve obtained from unlimited affinity constant. From these curve, the maximum and minimum detectable dose were approx. 2×10-10M and 4×10-14M, respectively. Seven out of 10 experimental curves for TSH showed good consistency with the corresponding theoretical curves which indicated that a mathematical analysis of equilibrium was useful to presume experimental results using monoclonal antibody. |
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| Practice | Clinical medicine |
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| Keywords | Affinity constant, Monoclonal antibody, Immunoradiometric assay, Human TSH, Equilibrium |
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